Hur man endospore fläck
En endospore är en vilande form av bakterien som gör det möjligt att överleva dåliga miljöförhållanden. Spore Stain är en differentiell fläck som används för att detektera närvaron och platsen för sporer inom vissa bakterier. Flera bakterier, speciellt de av släktet Bacillus och Clostridium, är kända för att producera endosporer. Endospore-färgning används för att differentiera och kategorisera bakterier. Det är också mycket viktigt i medicin och livsmedelsindustrin. Eftersom de är svåra att förstöra är det absolut nödvändigt att bestämma om de är närvarande i konserverad mat och därigenom undvika sjukdomar för att skydda köpare.
Steg
1. Förbered dig för experimentet genom att lägga på handskar, ha på sig en labbrock och samla material. Se saker du behöver nedan för referens. Ta en bild och skölj det med tvål och vatten. Använd bibulous papper för att torka bilden. Använd en svart sharpie för att rita en cirkel på botten av bilden för att identifiera det område för vilket bakterier kommer att smälta.
- Viktigt laboratoriesäkerhetslitage består av skyddsglasögon, stängda toedskor, handskar och labbrock.
2. Flamma inokuleringslingan och vänta 10 sekunder innan du lägger slingan i pipetten av bakterier.
3. Ställ in en bunsenbrännare på din ringstativ med ringklämman och en trådgas över den.
4. Fyll burken med kranvatten tills det är ungefär halvfullt. Placera burken ovanpå trådgasen på ringklämman.
5. Slå på Bunsen-brännaren för att värma / koka vattnet.Låt Steam börja dyka upp innan du lägger bilden på burken.Placera bilden med smet på toppen av burken.
6. Placera en bit pappershandduk ovanpå smeten på bilden och dränera pappershandduken med malakitgrönt färgämne.
7. Ånga smörjen över vattnet i 5 minuter.
8. Låt gliden svalna, ta bort papperet och skölj med vatten i 30 sekunder.
9. Lägg Safranin till bilden i 1 minut. Plastbägaren kan användas för att tömma överskottsfärgen.
10. Skölj av safranin med vatten för att ta bort överskott av färgämne. Blot gliden mellan ark av bibulous papper för att torka. Efter att gliden torkas kan den undersökas under ett mikroskop.
11. Visa bilden. Placera den på scenen. För denna typ av fläck kan bakterierna endast ses på högsta mål (100x), känd som oljedjupningslinsen. Denna olja förbättrar lösningen och kommer att låta ljuset fokusera perfekt på provet.
12. Undersök bilden för att se endospore. Den vegetativa cellen kommer att visas röd / rosa, medan endospore själv är färgad grön. Sporer kan vara placerade terminal, mitten eller subterminalen inuti den vegetativa cellen.
Saker du behöver
- Lämpliga bakterier som producerar endosporer
- Malakitgrön
- Safranin
- Mikroskop glidbanor
- bunsenbrännare
- Ringstativ
- Inokuleringslinga
- Metalltrådsduk
- Burk
- Mikroskop
- Bibulous papper
Tips
Läs anvisningarna noggrant.
Se till att du inte gör smörjen för tjock eftersom det kommer att orsaka komplikationer i att se endospore.
Var uppmärksam på tiden under experimentet.
Varningar
Om glasvaror bryts, kassera glas och bakterier genom lämpliga medel. Var noga med att följa lämpliga protokollprocedurer hela tiden när det gäller laboratorie-slitage och hanteringsutrustning.
Dela på det sociala nätverket: